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transwell細(xì)胞培養(yǎng)的原理及應(yīng)用

   transwell細(xì)胞培養(yǎng)是一種侵襲實驗技術(shù),其實原理簡單地說就是用一層膜將高營養(yǎng)的培養(yǎng)液和低營養(yǎng)的培養(yǎng)液隔開,細(xì)胞放在低營養(yǎng)的培養(yǎng)液里,為了找吃的,細(xì)胞會往高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面跑,但是有膜擋著,所以要穿過膜才行。我們在膜上涂上一層基質(zhì)膠,模仿細(xì)胞外基質(zhì),于是細(xì)胞要把基質(zhì)消化了才可以從低營養(yǎng)的培養(yǎng)液跑到高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面,*后我們檢測高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里細(xì)胞量就可以知道細(xì)胞的侵襲能力了。
  主要應(yīng)用有:
  (1)共培養(yǎng)體系:小于3.0um孔徑條件下,細(xì)胞不會遷徙通過,因此,若研究不涉及細(xì)胞運動能力,不需要細(xì)胞穿過聚碳酸酯膜,則應(yīng)選擇3.0µm以下孔徑。常用0.4、3.0µm。常用的是0.4µm。將細(xì)胞A種于上室,細(xì)胞B種于下室,可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的影響。
 ?。?)趨化性實驗:可用5.0、8.0、12.0µm膜,上室細(xì)胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室,計數(shù)進入下室的細(xì)胞量可反映下室成分對上室細(xì)胞的趨化能力。①細(xì)胞B對細(xì)胞A的趨化作用:將細(xì)胞A種于上室,細(xì)胞B種于下室,可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的趨化作用。②趨化因子對細(xì)胞的趨化作用:將細(xì)胞種于上室,下室加入某種趨化因子,可研究該趨化因子對細(xì)胞的趨化作用。
 ?。?)腫瘤細(xì)胞遷移實驗:常用8.0、12.0µm膜,上室種腫瘤細(xì)胞,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑,計數(shù)進入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的遷移能力。
 ?。?)腫瘤細(xì)胞侵襲實驗常用8.0、12.0µm膜,原理與腫瘤細(xì)胞遷移實驗類似。



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